新疆甜瓜组培体系的优化及抗病转基因研究Optimization of Tissue Culture System and Anti-fungal Transfection of Xinjiang Muskmelon
葛屹松,赵晓琴,李冠
摘要(Abstract)：
选用新疆优良甜瓜未成熟子叶切块作为外植体 ,经过组织培养获得再生植株 .以 MS为基本培养基 ,取3日龄子叶块外植体 ,选用 Ms+ 6-BA0 -2 .5 mg/ L诱导丛生芽 ,最高诱导率可达 89% .在整个再生体系建立过程中 ,6-BA的浓度逐渐降低 .在生根培养培养基中 ,附加活性炭和硝酸银有利于根的诱导 .在甜瓜高效再生体系基础上 ,用根癌农杆菌介导法将几丁质酶基因和 β-1 ,3-葡聚糖酶基因导入新疆甜瓜中 .经卡那霉素的抗性筛选 ,获得转化的再生植株 .用 PCR反应、点杂交及 SDS-PAGE等手段 ,进一步研究了再生植株的基因整合与表达情况 .经 PCR扩增反应和琼脂糖电泳检测 ,在转化植株中扩增出了特异片段 ,点杂交检测转化植株有阳性反应 .SDS-PAGE分析表明 ,转化植株比对照在 35 .5 KD处有一条明显的蛋白质谱带 ,其分子量与几丁质酶基因表达产物分子量相符 .初步确定该基因在转化植株内得到正常表达.
关键词(KeyWords)： 甜瓜;真菌病抗性;β-1,3-葡聚糖酶;几丁质酶
基金项目(Foundation): 新疆维吾尔自治区科委课题资助项目 ( 2 0 0 1 2 1 1 0 5 )
作者(Author): 葛屹松,赵晓琴,李冠