用p389ARG7转化和诱变莱茵衣藻(C.reinhardtii)CBN1基因的研究Studies on Mutagenesis of CBN1 Gene of Chlamydomonas Reinhardtii by Transformation with Plasmid p389ARG7
张文平,徐琴,杨红梅,艾尔肯·热合曼,吾甫尔·米吉提
摘要(Abstract):
用微玻璃珠研磨法将 p ARG7质粒转入到莱茵衣藻精氨酸依赖型、缺壁突变株品系 CC-1 61 8( arg7cw1 5 mt-)和 CC-1 61 7( arg7cw1 5 mt-)中 ,得到了一些不同的插入型突变转化子 .CC-1 61 7突变株品系的转化率为 72个 /μg DNA,CC-1 61 8突变株品系的转化率为 2 96个 /μg DNA,即转化率比 CC-1 61 7突变株品系高 .经多次转化共获得各种转化子 3 90 0多个 ,对它们进行荧光检测后检测出缺乏叶绿素 b的两个突变子ARGT3和 ARGT4,并进一步用高效液相色谱法对其光合色素含量进行检测结果证实 ,这两个突变体的确丧失了叶绿素 b合成能力 .它们将可作为 CBN1基因的克隆及其定位的有用的工具
关键词(KeyWords): 莱茵衣藻;微玻璃珠研磨法;转化;叶绿素b基因
基金项目(Foundation): 国家自然科学基金 ( 3 0 0 60 0 3 5 ) ;; 新疆大学基金
作者(Author): 张文平,徐琴,杨红梅,艾尔肯·热合曼,吾甫尔·米吉提
参考文献(References):
- [1]RochaixJ.D.,vanDillewijinJ.V.,Transfomation of the green algaChlamydomonas reinhardtii with yeastDNA[J].Nature.1982(296):1228-1232.
- [2]KindleK.L.High-frequency nuclear transformation ofChlamydomonas reinhardtii.Proc.Natl.Acad.Sci.USA.1990(87):1228-1232.
- [3]FordC,WangW.Temperature sensitive yellow mutants ofChlamydomonas reinhardtii[J].Mol.AndGen.Genet,1980,180(1):5-10.
- [4]FordC,MitchelS,WangW.Protochlorphyllide(Photoconversion) mutants ofChlamydomonas reinhardtii[J].Mol.andGen.Genet,1981,184(3):460-469.
- [5]PorraR,SchaferW.,CmielE etal.The derivation of the formyl-group oxygen of chlorophyll b in higherplants frommolecular oxygen[J].Eur.J.Biochem.,1994(219):671-679.
- [6]AyumiTanaka,HisashiIto,RyouichiTanaka etal.Chlorophyll a oxygenase(CAO) is involved in chlorophyll b for-mation from chlorophyll a[J].PlantBiology,1998,95:12719-12723.
- [7]HarrisE H.In:TheChlamydomonas sourcebook[M].SanDiego:Academy press,1989,701-780.
- [8]J.萨姆布鲁克,E.F.弗里奇,T.曼尼阿蒂斯.分子克隆实验指南[M].第三版.北京:科学出版社,1998,27-39.
- [9]ChunaevA.S.,MirnayaO.N.,MaslovV.G.et al.Chlorophyll b and loroxanthin-deficient mutants ofChlamy-domonas reinhardtii[J].Photosynthetica,1991,30(2):291-301.
- [10]ЧунаевА.С.,МирнаяО.Н.,ГаевскийН.,А.идр.Качественнаяоценкапризнака“отсутствиехлорофилла b”уChlamydomonas reihardtii[J].Генетика,1982,18(11):1906-1909.
- [11]袁建平,张义明,史贤明,等.高效液相色谱法测定藻类中的胡萝卜素和叶绿素[J].色谱,1997,15(2):132-134.
- [12]МирнаяО.Н.,Фомена-ОщенкоЮ.Г.,ЧунаевА.С.Множественныйаллелизмвгене cbn1контролирующемнакоплениехлорофиллаbуChlamydomonas reinhardtii[J].Генетика,1984,20(5):775-781.
- [13]ЧунаевА.С.,ЛадыгинВ.Г.,МирнаяО.Н.идр.Локализациямутации cbnIвпервойгруппесцепленияядерныхгеновChlamydomonas reinhardtii[J].Генетика,1990,26(5):958-960.
- [14]Г.Мижит,(吾甫尔·米吉提),К.В.Никулина,А.С.Чунаевидр.НакоплениебиосинтетическихпредшественниковфотосинтетическихпигментовврецессивныхмутантахпоядернымгенамChlamydomonas reinhardtii[D].докл..I IсъездабиохимическогообществаРОС.АК.НАУК.Москва,19-23мая1997г.Пущино337.
- [15]ChunaevA.S.,MirnayaO.N.,MaslovV.G.,BoschettiA.Chlorophyll b-and loroxanthin-deficient mutants ofChlamydomonas reinhardtii[J].Photosynthetica,1991,25(2):291-301.
- [16]吾甫尔·米吉提,艾尔肯·热合曼,K.V.Nikulina等.莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii) subcbn1基因的遗传学性质分析[J].遗传学报,2000,27(8):734-741.
- [17]Е.В.Ермилова,Ж.М.Залуцкая,Т.В.Лапинаидр.Геномхламидомонадаиметодыегоизучения[M].Санкт-Петербург,Омск:издательствоОмГПУ,2000,20-22.