新疆大学学报(自然科学版)(中英文)

2009, v.26;No.113(01) 20-26

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灰绿藜耐盐基因CgNHX转导新疆陆地棉的初步研究
Preliminary Studies on Cotton(Gossypium hirsutum) Transformation with Salt Tolerance Gene CgNHX from Chenopodium glaucum

徐栋生;宁新民;赵娟;李秀明;孔杰;谷丽丽;姚世响;孔庆平;兰海燕;张富春;

摘要(Abstract):

以新疆陆地棉为实验材料,通过花粉管通道法向优质棉花高代材料中导入了灰绿藜耐盐基因CgNHX.经过三年连续转导的结果显示:①大田注射期间的天气状况对转导成功影响较大.当昼夜温差较大且有露水时,花和铃的状态较好,导致结铃率、卡那霉素检测阳性率增加;②棉叶基因组DNA的提取质量与棉叶采后冷藏的时间有一定相关性.采后一周内提取的棉叶DNA质量较好,PCR检测获得30%的阳性率,而两周及以后的棉叶DNA质量降低,PCR检测未获得阳性结果;③在mRNA水平上检测转基因植株的表达较为困难.本实验中PCR检测阳性的30份样品,在RT-PCR检测中均未获得目的基因的明显特异扩增条带,只有部分样品在目的条带的位置出现弥散带型.本研究初步显示外源基因CgNHX已导入棉花受体中,但其表达情况还需进一步检测验证.

关键词(KeyWords): 耐盐基因;液泡膜Na+/H+反向运输体;花粉管通道法;棉花转导;PCR鉴定

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 新疆自治区十一五科技攻关重大专项项目(200731138-3);; 新疆生物资源与基因工程重点实验室开放基金(XJDX0201-2008-03)

作者(Author): 徐栋生;宁新民;赵娟;李秀明;孔杰;谷丽丽;姚世响;孔庆平;兰海燕;张富春;

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